Equipements de laboratoire

Cytomètre de flux CANTOII^© (Beckton Dickinson, Fluorescent Automated Cell Sorting)

La cytométrie en flux est une technique qui permet la mesure et l’analyse simultanée de nombreux paramètres physiques (taille, granularité et fluorescence relatives) de particules en suspension, d’une taille comprise entre 0,1 et 150 μm. Ces caractéristiques sont mesurées grâce à un système optique couplé à un système électronique, qui enregistre la dispersion de la lumière incidente et l’émission de fluorescence par les particules exposées à une source d’excitation laser.

La cytométrie en flux peut être utilisée pour différentes applications: caractérisations phénotypiques, mesures de la production de cytokines intracellulaires, modulations de l’expression d’antigènes membranaires après activation ou après transfection de cellules, analyses du cycle cellulaire, analyses de la concentration en calcium intracellulaire...

Le cytomètre CANTOII, obtenu grâce au soutien financier de la région Ile de France (DIM Maladies Infectieuses) et disponible à l’UMR BIPAR, possède 3 lasers (405nm, 488nm, 633nm) et permet ainsi de détecter de façon simultanée jusqu’à 10 paramètres différents dont 8 de fluorescence. Il est également équipé d’un échantillonneur à haut débit (HTS : High Throuput Sampler).

Il est ouvert aux chercheurs des laboratoires de recherche présents sur le site de l’EnvA et de l’ANSES, sur demande à Delphine Le Roux.

Microscope Confocal à balayage laser DMi8 à grand champ (Leica)

L’UMR est équipée d’un microscope confocal à balayage laser (CLSM: Confocal Laser Scanning Microscope) DMi8 à grand champ.

Il s’agit d’un microscope inversé équipé avec:

- objectifs 10x (ON 0.40), 20x (ON 0.7) à immersion, 40x (ON 1.30) à huile, 63x (ON 1.40) à huile, 100x (ON 1.40) à huile

- platine motorisée

- scanner tandem comprenant un scanner conventionnel de FOV linéaire de 22mm + et un scanner résonnant FOV linéaire de 13mm (8000 Hz ; 29 images/seconde à 512*512)

- Lasers diodes 405, 488, 552, 638 nm

- 4 détecteurs: 1 PMT et 2 HyD (ultra-sensibles) pour la fluo, 1 PMT pour la transmission

- Source fluo LED Sola SMII et filtres long pass pour l'observation de la fluo aux oculaires

- chambre avec température (de +5°C à +50 °C) et CO2 pour live imaging

Microscope confocal (@G. Karadjian, UMR BIPAR)